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Las células madre mesenquimales humanas procedentes de la médula ósea (hMSCs) tienen un amplio potencial terapéutico. Estas células se pueden aislar fácilmente de la médula ósea por su propiedad de adherirse a los materiales de cultivo tratados con tejidos. Sin embargo, las tasas de proliferación y otras propiedades de las células cambian gradualmente durante la expansión. Este estudio pretende validar el protocolo de aislamiento y diferenciación de hMSCs a partir de médula ósea para aplicaciones terapéuticas.

Las células tenían una morfología saludable. Eran positivas para los marcadores CD105, CD90 y CD73 y negativas para CD45, CD34 y HLA-DR. Las células podían diferenciarse en células grasas, óseas y neurales.

Se aislaron y diferenciaron las MSC de la médula ósea. Estas células estaban morfológicamente sanas y superaron el ensayo de UFC. Las células mostraron un potencial de diferenciación hacia el tejido óseo, graso y neural. Estas células pueden utilizarse en aplicaciones terapéuticas.

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Caracterizar la ultraestructura de las células madre mesenquimales (MSCs) que fueron cosechadas del tejido adiposo (AT-MSCs) y de la médula ósea (BM-MSCs) de caballos y transfectadas con proteína verde fluorescente.

Las MSC equinas cosechadas se cultivaron y transfectaron con proteína verde fluorescente, y los inmunofenotipos de las MSC se caracterizaron mediante el uso de anticuerpos monoclonales anti-CD90 y anti-CD105. Cuando se logró la transfección estable de las MSC, se compararon con microscopía electrónica las características morfológicas y ultraestructurales de las AT-MSC y las BM-MSC transfectadas y no transfectadas.

Los protocolos de transfección y posterior aislamiento de las células transfectadas con el uso de G418 fueron adecuados para obtener MSCs transfectadas. La eficacia de la transfección fue del 5% en las AT-MSC y del 4% en las BM-MSC. La caracterización de las MSC transfectadas y no transfectadas reveló que comparten perfiles inmunocitoquímicos y morfológicos. La expresión de CD90 fue significativamente mayor en las AT-MSC transfectadas que en las no transfectadas (97% frente a 92%). La expresión de CD105 fue significativamente menor en las BM-MSC transfectadas que en las no transfectadas (85% frente a 94%). Las BM-MSC transfectadas presentaban diferencias en los orgánulos, en comparación con los otros tipos celulares, incluyendo específicamente el retículo endoplásmico rugoso con cisternas dilatadas y mitocondrias.

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Introducción: Las células madre mesenquimales humanas procedentes de la médula ósea (hMSCs) tienen un amplio potencial terapéutico. Estas células se pueden aislar fácilmente de la médula ósea por su propiedad de adherirse a los materiales de cultivo tratados con tejidos. Sin embargo, las tasas de proliferación y otras propiedades de las células cambian gradualmente durante la expansión. Este estudio pretende validar el protocolo de aislamiento y diferenciación de hMSCs a partir de médula ósea para aplicaciones terapéuticas.

Métodos: Se extrajeron 60 ml de médula ósea de 5 pacientes y se aislaron MSCs. Éstas se caracterizaron por citometría de flujo, ensayo de UFC y se diferenciaron en células óseas, grasas y neurocitos.

Resultados: Las células tenían una morfología saludable. Eran positivas para los marcadores CD105, CD90 y CD73 y negativas para CD45, CD34 y HLA-DR. Las células podían diferenciarse en células grasas, óseas y neuronales.

Conclusiones: Se aislaron y diferenciaron las MSC de la médula ósea. Estas células eran morfológicamente sanas y pasaron el ensayo de UFC. Las células mostraron un potencial de diferenciación hacia el tejido óseo, graso y neural. Estas células pueden utilizarse en aplicaciones terapéuticas.